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第一部分 生物化学实验指导3

第一章 常用生物化学实验技术原理3

第一节 分光光度法3

第二节 层析法13

第三节 电泳法41

第四节 离心分离法60

第二章 生物化学基础实验66

实验一 糖的显色反应和定性鉴定66

实验二 总糖的测定（1）——3，5-二硝基水杨酸比色定糖法68

总糖的测定（2）——蒽酮比色法71

实验三 蛋白质的两性反应和等电点的测定72

实验四 蛋白质的沉淀及变性实验74

实验五 蛋白质的呈色反应76

实验六 考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量78

实验七 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳80

实验八 紫外光谱吸收法测定蛋白质含量81

实验九 影响酶活性的因素82

实验十 酶的特异性84

第三章 生物化学大实验86

实验十一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质86

实验十二 离子交换层析法分离氨基酸89

实验十三 氨基酸的分离——纸层析法92

实验十四 粗脂肪的提取和定量测定95

实验十五 大蒜细胞SOD的提取与分离97

实验十六 淀粉酶活力的测定100

实验十七 果蔬维生素C含量的测定103

实验十八 脂肪的碱水解及组分鉴定105

实验十九 植物材料中总黄酮的提取与测定107

实验二十 可溶性糖的硅胶G薄层层析109

实验二十一 糖酵解中间产物的鉴定112

实验二十二 碱性磷酸酶Km的测定114

实验二十三 卵清蛋白的分段盐析、透析117

实验二十四 碘值的测定119

实验二十五 乳酸脱氢酶粗提液的制备和活力测定121

实验二十六 糖的酵解作用124

实验二十七 转氨基作用127

第二部分 分子生物学实验指导133

第四章 分子生物学实验一般原理133

第一节 分子生物学概述133

第二节 载体136

第三节 分子生物学中常用的工具酶147

第四节 基因组文库和cDNA文库的构建152

第五节 DNA重组与鉴定156

第六节 PCR基因扩增162

第七节 DNA序列测定175

第八节 外源基因的蛋白表达183

第五章 学生实验（综合性、设计性实验）194

实验一 总DNA的提取194

实验二 琼脂糖凝胶电泳检测DNA199

实验三 PCR扩增及扩增产物的回收201

实验四 DNA重组204

实验五 CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞207

实验六 重组质粒的转化及筛选209

实验七 质粒DNA的提取及其定性定量分析212

实验八 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测215

实验九 重叠延伸PCR介导的定点突变220

实验十 探针制备和Southern Blot223

Ⅰ 核酸探针的制备224

Ⅱ DNA杂交225

实验十一 反向PCR229

实验十二 总RNA提取和Northern Blot232

Ⅰ 植物总RNA提取233

Ⅱ RNA杂交235

实验十三 反转录PCR和RACE239

Ⅰ 反转录PCR（RT-PCR）239

Ⅱ RACE243

附录250

参考文献272